Questões de Biologia Molecular (Análises Clínicas)

Análises Clínicas Biologia Molecular

Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ) - Médico - FGV (2010)

A técnica de hibridização in situ pode utilizar diversas estratégias de acordo com seu propósito. Sendo assim, assinale a afirmativa correta:

A Na figura os números 3 e 4 representam uma hibridização sonda/alvo, respectivamente, ADN/ARN e ARN/ADN.
B Na figura o número 5 representa uma hibridização de ARN dupla fita.
C Na figura os números 1 e 2 representam moldes (templates) de ADN.
D Na figura o número 1 representa uma sonda fluorescente de ARN.
E Na figura o número 2 representa uma sonda fluorescente de ADN.

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Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ) - Diversos Cargos - FGV (2010)

Sobre as boas práticas laboratoriais relacionadas à rotina de diagnóstico molecular por PCR, analise as afirmativas a seguir.

I. A única área que deve ser separada fisicamente das demais, no laboratório que realiza diagnóstico molecular por PCR, é a área onde é realizada a extração de ácidos nucléicos a partir das amostras clínicas.

II. O fluxo de trabalho, no laboratório que realiza diagnóstico molecular por PCR, deve ser sempre a partir da área livre de DNA para a área onde os tubos das reações finais de PCR são abertos ou manipulados (área que contem amplicons).

III. Para a pipetagem das misturas de PCR, diluição de oligonucleotídeos, etc, não é necessária a utilização de ponteiras com barreira.

Assinale:

A se somente a afirmativa I estiver correta.
B se somente a afirmativa II estiver correta.
C se somente a afirmativa III estiver correta.
D se somente as afirmativas I e II estiverem corretas.
E se todas as afirmativas estiverem corretas.

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Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ) - Médico - FGV (2010)

A hibridação in situ cromogênica pode ser utilizada para detectar HPV (papilomavirus humano), vírus herpes simples tipo 1 e 2 (HSV-1 e HSV-2) e outros patógenos virais em biópsias. Com relação a esta técnica, assinale a afirmativa correta.

A A hibridação in situ cromogênica é mais indicada para biópsias de tecido do que a hibridação in situ fluorescente (FISH) pois permite a manutenção da morfologia do tecido.
B Não é possível realizar hibridação in situ cromogênica e exame citológico para HPV na mesma amostra.
C A amplificação com biotinil-tiramida (Tyramide Signal Amplification, TSA) pode ser utilizada para amplificar o sinal de uma hibridação in situ cromogênica, mas não de uma hibridação in situ fluorescente (FISH).
D A hibridação in situ cromogênica somente pode ser realizada com sondas de ADN.
E Uma das vantagens da hibridação in situ cromogênica em relação à hibridação in situ fluorescente (FISH) é a maior resistência das sondas cromogênicas à degradação pela exposição à luz ambiente.

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Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ) - Médico - FGV (2010)

A detecção de ácidos nucléicos derivados de vírus ou bactérias pode ser essencial para o diagnóstico de uma doença. Sendo assim, assinale a afirmativa correta.

A O protocolo de hibridização in situ leva em consideração a origem da sonda, ou seja, se for para detectar bactérias não se deve utilizar plasmídios como molde para sondas.
B Quando a suspeita é infecção de retrovírus, a melhor opção é utilizar uma sonda construída com Uracila e Timidina para garantir uma reação mais eficaz.
C Uma estratégia para hibridização ADN/ADN, é tratar o material com ARNase, evitando assim hibridização inespecífica com moléculas de ARN.
D A vantagem da hibridização in situ é que pode-se aplicar sondas utilizadas em PCR.
E Após a reação de hibridização in situ, deve-se sequenciar o resultado da hibridização para identificar o agente patogênico.

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Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ) - Diversos Cargos - FGV (2010)

Assinale a afirmativa incorreta:

A A metodologia de PCR em Tempo-Real é a única metodologia de PCR quantitativo existente.
B É a curva de dissociação obtida ao final da corrida de PCR em Tempo-Real que permite a verificação da especificidade da amplificação obtida.
C Na metodologia de PCR em Tempo-Real, a utilização de sondas marcadas com fluoróforos permite a realização de reações multiplex.
D Na metodologia de PCR em Tempo-Real, quanto maior for a quantidade de DNA alvo presente em uma dada amostra um menor número de ciclos de PCR será necessário para se obter uma quantidade de fluorescência a partir desta dada amostra acima do ruído de fundo do aparelho (Ct).
E A técnica de PCR em Tempo-Real é mais sensível que a técnica de PCR convencional.